Определение вальпроевой кислоты и ее метаболитов в плазме крови методом вэжх-масс-спектрометрии (вэжх-мс/мс)

Цель – разработка методики ВЭЖХ-МС/МС определения вальпроевой кислоты и ее метаболитов в плазме крови для терапевтического лекарственного мониторинга.

Материалы и методы. Хроматографию выполняли с использованием хроматографа Agilent 1260 Infinity II  (аналитическая колонка Phenomenex synergi Fusion 4 мкм-C18  2×50 мм). В качестве подвижной фазы использовали смесь  метанола и воды деионизированной в соотношении 90:10 с добавлением 0,1% аммония ацетата в изократическом режиме,  скорость потока подвижной фазы – 0,5 мл/мин. Масс-спектрометрическую идентификацию вальпроевой кислоты  осуществляли при отрицательной поляризации в режиме  регистрации множественных ионов (MIM) по значению m/z 143,1. Диапазон применения методики составил от 1 до 200 мкг/мл.  Масс-спектрометрическую идентификацию 2-пропил-4-ентаноил- β-О-глюкуронида, 2-пропил-4-пентеновой, 3-гидрокси-2- пропилпентановой, 4-гидрокси-2-пропилпентановой, 2-пропилпентандиовой и 3-оксо-2-пропилпентановой кислот  осуществляли при отрицательной поляризации по значению  MRM-переходов: m/z 319,2→143,2; m/z 140,1→140,1; m/z  159,1→101; m/z 159,1→123,1; m/z 173→129,1; 157,05→113  соответственно. Аналитический диапазон методики определения  метаболитов составил 10-500 нг/мл.

Результаты. Разработанная методика позволяет определять  вальпроевую кислоту и ее метаболиты в одной пробе без  отдельной пробоподготовки, что увеличивает информативность  исследования без повышения его стоимости.

Заключение. Внедрение методики количественного  определения вальпроевой кислоты и ее метаболитов в плазме  крови в работу клинических лабораторий позволит обеспечить  индивидуальный подход к лечению пациентов с эпилепсией, тем  самым повысив эффективность и безопасность фармакотерапии.

1. Айвазян С. О. Терапевтический лекарственный мониторинг антиконвульсантов у детей. Эпилепсия и пароксизмальные состояния. 2010; 2 (3): 2-7.

2. Батурин В. А., Батурина М. В., Котова А. А., Скрипнюк А. А. Рутинная практика терапевтического лекарственного мониторинга – некоторые итоги работы в системе ОМС. Качественная клиническая практика. 2016; 1: 47-49.

3. Белоусов Ю. Б., Леонова М. В., Штейнберг Л. Л., Тищенкова И. Ф. Терапевтический лекарственный мониторинг в реальной практике. Эпилепсия и пароксизмальные состояния. 2013; 3: 6-15.

4. Леонова М. В., Ивжиц М. А., Тищенкова И. Ф. и др. Терапевтический лекарственный мониторинг антиконвульсантов у детей в реальной практике. Эпилепсия и пароксизмальные состояния. 2017; 9 (1): 26-34.

5. Якунина А. В., Повереннова И. Е. Роль терапевтического лекарственного мониторинга при использовании противоэпилептических препаратов. Эпилепсия и пароксизмальные состояния. 2016; 3: 66-73.

6. Приказ МЗ РФ от 22.10.2003 №494 «О совершенствовании деятельности врачей клинических фармакологов».

7. Шнайдер Н. А., Дмитренко Д. В. Хроническая интоксикация вальпроевой кислотой в эпилептологии: диагностика и лечение. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2016; 8 (2): 94-99.

8. Sztajnkrycer M. D. Valproic acid toxicity: overview and management. J Toxicol Clin Toxicol. 2002; 40 (6): 789-801.

9. Попов Н. С., Малыгин А. С., Демидова М. А. Разработка ВЭЖХ-МС/МС-метода для идентификации и количественного определения нового производного тиадиазола. Современные проблемы науки и образования. 2017; 5: URL: www.science- education.ru/ru/article/view?id=26988. Дата обращения: 12.03.2018.

10. Zhao M., Li G., Qiu F., Sun Y. Development and Validation of a Simple and Rapid UPLC-MS Assay for Valproic Acid and Its Comparison With Immunoassay and HPLC Methods. Ther Drug Monit. 2016; 38 (2): 246-252.

11. Wen D., Chen Z., Yang C., Liu H. et al. A rapid and simple HPLC-MS/MS method for the simultaneous quantification of valproic acid and its five metabolites in human plasma and application to study pharmacokinetic interaction in Chinese epilepsy patients. J of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2018; 149 (5): 448-456.

12. Zhao M., Zhang T., Li G, Qiu F., Sun Y., Zhao L. Simultaneous Determination of Valproic Acid and Its Major Metabolites by UHPLC-MS/MS in Chinese Patients: Application to Therapeutic Drug Monitoring. J Chromatogr Sci. 2017; 55 (4): 436-444.

13. Береговых В. В. Валидация аналитических методик для производителей лекарств. Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств. М. 2008; 18-65.

14. Guidance for Industry: Bioanalytical method validation. US Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER), US Government Printing Office, Washington, DC, 2001.

15. Upendra A., Remmel A., Remmel P. Effect of Aging on Glucuronidation of Valproic Acid in Human Liver Microsomes and the Role of UDP-Glucuronosyltransferase UGT1A4, UGT1A8, and UGT1A10. Drug Metabolism and Disposition. 2009; 37 (1): 229-236.